سكشن الميكرو رقم 2
ziehl -neelsen stain(acid fast stain
)
(tubercle bacillus)
(T.B)
الادوات المستخدمه: نفس الادوات السابقه
الشريحه هتنزل عليها ال
M.O
وانا هبدا بخطوة ال
fixation
نتكلم الاول علي
zeihl-neelsen stain
(acid fast stain)
fast=stable
(1) acid fast bacteria
*
red
ex(1): mycobacterium tubular culosis(tubercule bacillus)(T.B)
ex(2) mycobacterium libra and
m
ycobacterium pheli.
** can not stain by normal ways but need consrible condition
لان الخليه حواليها طبقه دهنيه صعب اختراقها بالصبغه العاديه
(2) no acid-fast stain bacteria
*blue
ex:bacilli , staph
**can stain by normal ways
**easily stain decolurization
@@decolurizing agent
*
ex(1): mycobacterium tubular culosis(tubercule bacillus)(T.B: 20%h2so4 or 3% Hcl
ex(2)mycobacterium librabacillus
: 3% Hcl , 5% H2so4
(3) mycobacterium pheli: 5% H2so4
خطوات العمل:
(1) لازم احافظ علي وش الشريحه
(2) اعمل
fixation
امرر الشريحه من 5 ل6 مرات علي النار
(3) اضع الشريحه علي الحامل اللي علي الحوض وعلي فكره الراك ده بيجي سبوت ف الامتحاااااااااااااااااان شوفتو الجنان المهم اوعو تنسو اسمه stand
اضع الشريحه عليه بحيث ماتكونش مايله
(4) اغمر الشريحه كلها ب
dye (carbol fuchin) لونها بينك او احمر
(5) اسخن الشريحه علي النار بحيث اني احرك اللهب باستمرار (لا يثبت اللهب علي الشريحه) اول ما الاحظ خروج fumes احسب عشر دقايق بحيث اتجنب حدوث *draying or boiling
يعني كل ما الاقي الشريحه نشفت ازود الصبغه والغليان اتجنبه بابعاد اللهب باستمرار عن الشريحه يعني احطه واشيله فترات متقطعه يعني
(6) اسيب الشريحه تبرد واغسلها بماء والاحظ المايه تبقي نازله خفيفه علي الشريحه
(7) اعمل
decolurization by (acid-alcohol solution)
اضع الشريحه ف البيكر عموديه واسيبها 60 ثانيه واخرجها واغسلها واشوف اللون لسه بينك ولا بقي كلرليس لو لسه بينك اكرر الخطوه احطها 60 ثانيه وارجع اغسل وهكذا لحد ماتبقي كلرليس
*ملحوظه الخطوه دي ممكن تاخد 15 دقيقه ماتقلقوش يعني وراها وراها
(8) بعد كده ارجع الشريحه علي الحامل واغمرها ب
(counter stain(methylene blue)
واسيبها دقيقتين
(9) اغسل الشريحه واسيبها تنشف او انشفها علي النار
(10) ضع نقطة زيت علي الشريحه وافحصها تحت الميكروسكوب
نتيجة الفحص:
عندنا احتمالين:
(1) T.B bresent
لو ال
T.B موجود
هلاقي الشريحه عباره عن ارضيه زرقه وفيها خطوط صغيره قوي بينك
blue ground contain bink rods
ملحوظه: ممكن عدد
T.B (bink rods) يبقي قليل جدا واحه او اتنين بس علشان كده ما اتسرعش وافحص الشريحه كلها حته حته قبل ما اقول bostive or negative
(2) T.B absent
blue back ground free from bink rods
في جزئيه لسه ف السكشن اسمها
spor stain(structure stain)
بتنزل
spot بس
bacillus sp
may be sporutated form or vegetative form
افرق بينهم الزاي خلي بالكوا معايا بعمل الخطوات دي والنتيجه بتفرق ف اللتنين
دي التجربه الاساسيه:
(1) heat (stain malachite green)
(2) decolurization
(3) colour stain by safranine
شوفوووووووووووووووووو النتيجه بقي هتبقي 1 و2 و3 زي الخطوات الي فاتت
اول حاله
sporutated form (1) green
(2) green
(3) green
يعني السبور بيبقي اخضر مش اخضر قوي هو بيبقي اخضر فاتح بس بيبقي مميز ماتقلقوش
vegetative formosis
(1) green
(2) colourless
(3) red
كده خلص السكشن التاني ربنا معاكم وماتنسوش تدعولي [-O<[-O<[-O<
